ఆస్టియో ఆర్థరైటిస్ (OA) అనేది దీర్ఘకాలిక దీర్ఘకాలిక క్షీణించిన ఎముక ఉమ్మడి వ్యాధులలో ఒకటి, ఇది 65 ఏళ్లు పైబడిన జనాభాను ప్రభావితం చేస్తుంది.
1]. సాధారణంగా, OA రోగులు దెబ్బతిన్న మృదులాస్థి, ఎర్రబడిన సైనోవియం మరియు ఎరోడెడ్ కొండ్రోసైట్‌లతో బాధపడుతున్నారు, ఇవి నొప్పి మరియు శారీరక బాధలను ప్రేరేపిస్తాయి [
2]. కీళ్ల నొప్పులు ప్రధానంగా కీళ్లలో మంట ద్వారా మృదులాస్థి క్షీణించడం వల్ల సంభవిస్తాయి మరియు మృదులాస్థి తీవ్రంగా దెబ్బతిన్నప్పుడు ఎముకలు ఒకదానితో ఒకటి ఢీకొని భరించలేని నొప్పి మరియు శారీరక కష్టాలను కలిగిస్తాయి.
3]. నొప్పి, వాపు మరియు ఉమ్మడి యొక్క దృఢత్వం వంటి లక్షణాలతో తాపజనక మధ్యవర్తుల ప్రమేయం చక్కగా నమోదు చేయబడింది. OA రోగులలో, మృదులాస్థి మరియు సబ్‌కోండ్రల్ ఎముక యొక్క కోతకు కారణమయ్యే ఇన్ఫ్లమేటరీ సైటోకిన్‌లు సైనోవియల్ ద్రవంలో కనిపిస్తాయి.
4]. OA రోగులకు సాధారణంగా వచ్చే రెండు ప్రధాన ఫిర్యాదులు నొప్పి మరియు సైనోవియల్ ఇన్ఫ్లమేషన్. అందువల్ల ప్రస్తుత OA చికిత్సల యొక్క ప్రాధమిక లక్ష్యాలు నొప్పి మరియు వాపును తగ్గించడం. [
5]. నాన్-స్టెరాయిడ్ మరియు స్టెరాయిడ్ డ్రగ్స్‌తో సహా అందుబాటులో ఉన్న OA చికిత్సలు నొప్పి మరియు మంటను తగ్గించడంలో సమర్థతను నిరూపించినప్పటికీ, ఈ ఔషధాల యొక్క దీర్ఘకాలిక ఉపయోగాలు హృదయనాళ, గ్యాస్ట్రో-ప్రేగు మరియు మూత్రపిండ పనిచేయకపోవడం వంటి తీవ్రమైన ఆరోగ్య పరిణామాలను కలిగి ఉంటాయి.
6]. అందువల్ల, ఆస్టియో ఆర్థరైటిస్ చికిత్స కోసం తక్కువ దుష్ప్రభావాలతో మరింత ప్రభావవంతమైన ఔషధం అభివృద్ధి చేయబడాలి.
సహజ ఆరోగ్య ఉత్పత్తులు సురక్షితమైనవి మరియు సులభంగా లభ్యమవుతున్నాయి [
7]. సాంప్రదాయ కొరియన్ మందులు ఆర్థరైటిస్‌తో సహా అనేక తాపజనక వ్యాధులకు వ్యతిరేకంగా సమర్థతను నిరూపించాయి.
8]. ఆక్లాండియా లాప్పా DC. నొప్పిని తగ్గించడానికి మరియు కడుపుని శాంతపరచడానికి క్వి యొక్క ప్రసరణను మెరుగుపరచడం వంటి ఔషధ గుణాలకు ప్రసిద్ధి చెందింది మరియు సాంప్రదాయకంగా సహజ అనాల్జేసిక్‌గా ఉపయోగించబడింది.
9]. A. లప్పా శోథ నిరోధక శక్తిని కలిగి ఉందని మునుపటి నివేదికలు సూచిస్తున్నాయి [
10,
11], అనాల్జేసిక్ [
12], క్యాన్సర్ నిరోధకం [
13], మరియు గ్యాస్ట్రోప్రొటెక్టివ్ [
14] ప్రభావాలు. A. లాప్పా యొక్క వివిధ జీవసంబంధ కార్యకలాపాలు దాని ప్రధాన క్రియాశీల సమ్మేళనాల వల్ల కలుగుతాయి: కాస్టూనోలైడ్, డీహైడ్రోకోస్టస్ లాక్టోన్, డైహైడ్రోకోస్తునోలైడ్, కాస్టస్లాక్టోన్, α-కాస్టోల్, సాసురియా లాక్టోన్ మరియు కాస్టస్లాక్టోన్ [
15]. NF-kB మరియు హీట్ షాక్ ప్రోటీన్ పాత్‌వే నియంత్రణ ద్వారా మాక్రోఫేజ్‌లను ప్రేరేపించిన లిపోపాలిసాకరైడ్ (LPS)లో కాస్టూనోలైడ్ యాంటీ ఇన్ఫ్లమేటరీ లక్షణాలను చూపించిందని మునుపటి అధ్యయనాలు పేర్కొన్నాయి.
16,
17]. అయినప్పటికీ, OA చికిత్స కోసం A. లప్పా యొక్క సంభావ్య కార్యకలాపాలను ఏ అధ్యయనం పరిశోధించలేదు. ప్రస్తుత పరిశోధన (మోనోసోడియం-అయోడోఅసెటేట్) MIA మరియు ఎసిటిక్ యాసిడ్-ప్రేరిత ఎలుకల నమూనాలను ఉపయోగించి OAకి వ్యతిరేకంగా A. లప్పా యొక్క చికిత్సా ప్రభావాలను పరిశోధించింది.
మోనోసోడియం-అయోడోఅసిటేట్ (MIA) అనేది జంతువులలో చాలా నొప్పి ప్రవర్తనలు మరియు OA యొక్క పాథోఫిజియోలాజికల్ లక్షణాలను ఉత్పత్తి చేయడానికి ప్రముఖంగా ఉపయోగించబడుతుంది.
18,
19,
20]. మోకాలి కీళ్లలోకి ఇంజెక్ట్ చేసినప్పుడు, MIA కొండ్రోసైట్ జీవక్రియను అస్తవ్యస్తం చేస్తుంది మరియు OA యొక్క ప్రధాన లక్షణాలైన మృదులాస్థి మరియు సబ్‌కోండ్రల్ ఎముక కోత వంటి మంట మరియు తాపజనక లక్షణాలను ప్రేరేపిస్తుంది.
18]. ఎసిటిక్ యాసిడ్‌తో ప్రేరేపించబడిన వ్రాత ప్రతిస్పందన జంతువులలో పరిధీయ నొప్పి యొక్క అనుకరణగా విస్తృతంగా పరిగణించబడుతుంది, ఇక్కడ తాపజనక నొప్పిని పరిమాణాత్మకంగా కొలవవచ్చు [
19]. మౌస్ మాక్రోఫేజ్ సెల్ లైన్, RAW264.7, వాపుకు సెల్యులార్ ప్రతిస్పందనలను అధ్యయనం చేయడానికి ప్రముఖంగా ఉపయోగించబడుతుంది. LPSతో సక్రియం అయిన తర్వాత, RAW264 మాక్రోఫేజ్‌లు తాపజనక మార్గాలను సక్రియం చేస్తాయి మరియు TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS మరియు IL-6 వంటి అనేక తాపజనక మధ్యవర్తులను స్రవిస్తాయి.
20]. ఈ అధ్యయనం MIA యానిమల్ మోడల్, ఎసిటిక్ యాసిడ్-ప్రేరిత జంతు నమూనా మరియు LPS-యాక్టివేటెడ్ RAW264.7 కణాలలో OAకి వ్యతిరేకంగా A. లాప్పా యొక్క యాంటీ-నోకిసెప్టివ్ మరియు యాంటీ ఇన్ఫ్లమేటరీ ప్రభావాలను అంచనా వేసింది.
2. మెటీరియల్స్ మరియు పద్ధతులు
2.1 ప్లాంట్ మెటీరియల్
A. లప్పా DC యొక్క ఎండిన రూట్. ప్రయోగంలో ఉపయోగించిన ఎపులిప్ ఫార్మాస్యూటికల్ కో., లిమిటెడ్ (సియోల్, కొరియా) నుండి సేకరించబడింది. దీనిని ప్రొఫెసర్ డోన్‌ఘున్ లీ, హెర్బల్ ఫార్మకాలజీ విభాగం, కల్నల్ ఆఫ్ కొరియన్ మెడిసిన్, గచోన్ విశ్వవిద్యాలయం గుర్తించారు మరియు వోచర్ నమూనా సంఖ్య 18060301గా జమ చేయబడింది.
2.2 A. లప్పా సారం యొక్క HPLC విశ్లేషణ
రిఫ్లక్స్ ఉపకరణాన్ని (స్వేదనజలం, 100 °C వద్ద 3 గం) ఉపయోగించి A. లప్పా సంగ్రహించబడింది. వెలికితీసిన ద్రావణాన్ని తక్కువ పీడన ఆవిరిపోరేటర్ ఉపయోగించి ఫిల్టర్ చేసి ఘనీభవించారు. A. లప్పా సారం −80 °C కింద ఫ్రీజ్-ఎండబెట్టిన తర్వాత 44.69% దిగుబడిని కలిగి ఉంది. A. లప్పా యొక్క క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ 1260 ఇన్ఫినిటీⅡ HPLC-సిస్టమ్ (ఎజిలెంట్, పాల్ ఆల్టో, CA, USA) ఉపయోగించి కనెక్ట్ చేయబడిన HPLCతో నిర్వహించబడింది. వర్ణ విభజన కోసం, EclipseXDB C18 నిలువు వరుస (4.6 × 250 mm, 5 µm, ఎజిలెంట్) 35 °C వద్ద ఉపయోగించబడింది. మొత్తం 100 mg నమూనా 10 mL 50% మిథనాల్‌లో కరిగించబడుతుంది మరియు 10 నిమిషాల పాటు సోనికేట్ చేయబడింది. 0.45 μm యొక్క సిరంజి ఫిల్టర్ (వాటర్స్ కార్ప్., మిల్‌ఫోర్డ్, MA, USA)తో నమూనాలు ఫిల్టర్ చేయబడ్డాయి. మొబైల్ దశ కూర్పు 0.1% ఫాస్పోరిక్ ఆమ్లం (A) మరియు అసిటోనిట్రైల్ (B) మరియు కాలమ్ క్రింది విధంగా తొలగించబడింది: 0-60 నిమి, 0%; 60-65 నిమిషాలు, 100%; 65-67 నిమి, 100%; 67-72 నిమి, 1.0 mL/min ప్రవాహం రేటుతో 0% ద్రావకం B. 10 μL ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్‌ను ఉపయోగించి 210 nm వద్ద ప్రసరించేది గమనించబడింది. విశ్లేషణ మూడుసార్లు జరిగింది.
2.3 యానిమల్ హౌసింగ్ మరియు మేనేజ్‌మెంట్
5 వారాల వయస్సు గల మగ స్ప్రాగ్-డావ్లీ (SD) ఎలుకలు మరియు 6 వారాల వయస్సు గల మగ ICR ఎలుకలను Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) నుండి కొనుగోలు చేశారు. స్థిరమైన ఉష్ణోగ్రత (22 ± 2 °C) మరియు తేమ (55 ± 10%) మరియు 12/12 h యొక్క కాంతి/చీకటి చక్రం ఉపయోగించి జంతువులను ఒక గదిలో ఉంచారు. ప్రయోగం ప్రారంభించడానికి ముందు జంతువులకు ఒక వారం కంటే ఎక్కువ కాలం పరిస్థితి గురించి తెలుసు. జంతువులకు ఫీడ్ మరియు నీటి యాడ్ లిబిటమ్ సరఫరా ఉంది. గాచోన్ విశ్వవిద్యాలయం (GIACUC-R2019003)లో జంతు సంరక్షణ మరియు నిర్వహణ కోసం ప్రస్తుత నైతిక నియమాలు అన్ని జంతు ప్రయోగాత్మక విధానాలలో ఖచ్చితంగా అనుసరించబడ్డాయి. ఈ అధ్యయనం పరిశోధకుడి-బ్లైండ్ మరియు సమాంతర విచారణను రూపొందించబడింది. మేము యానిమల్ ఎక్స్‌పెరిమెంటల్ ఎథిక్స్ కమిటీ మార్గదర్శకాల ప్రకారం అనాయాస పద్ధతిని అనుసరించాము.
2.4 MIA ఇంజెక్షన్ మరియు చికిత్స
ఎలుకలను యాదృచ్ఛికంగా 4 గ్రూపులుగా విభజించారు, అవి షామ్, కంట్రోల్, ఇండోమెథాసిన్ మరియు ఎ. లాప్పా. 2% ఐసోఫ్లోరేన్ O2 మిశ్రమంతో మత్తుమందు చేయబడి, ఎలుకలకు 50 μL MIA (40 mg/m; సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్, సెయింట్ లూయిస్, MO, USA) ఉపయోగించి ఇంట్రా-ఆర్టిక్యులర్‌గా మోకాలి కీళ్లలోకి ప్రయోగాత్మక OAకి దారితీసింది. చికిత్సలు క్రింది విధంగా నిర్వహించబడ్డాయి: నియంత్రణ మరియు షామ్ సమూహాలు AIN-93G ప్రాథమిక ఆహారంతో మాత్రమే నిర్వహించబడతాయి. ఇండోమెథాసిన్ సమూహం AIN-93G డైట్‌లో చేర్చబడిన ఇండోమెథాసిన్ (3 mg/kg)తో మాత్రమే అందించబడింది మరియు A. లప్పా (300 mg/kg)తో అనుబంధంగా ఉన్న AIN-93G డైట్‌కు A. లప్పా 300 mg/kg సమూహం కేటాయించబడింది. ప్రతిరోజూ 190-210 గ్రా శరీర బరువుకు 15-17 గ్రా చొప్పున OA ఇండక్షన్ రోజు నుండి 24 రోజుల పాటు చికిత్సలు కొనసాగించబడ్డాయి.
2.5 బరువు బేరింగ్ కొలత
OA ఇండక్షన్ తర్వాత, షెడ్యూల్ ప్రకారం అసమర్థత-MeterTester600 (IITC లైఫ్ సైన్స్, వుడ్‌ల్యాండ్ హిల్స్, CA, USA)తో ఎలుకల వెనుక అవయవాల బరువును మోసే సామర్థ్యాన్ని కొలవడం జరిగింది. వెనుక అవయవాలపై బరువు పంపిణీ గణించబడింది: బరువు మోసే సామర్థ్యం (%)
