కొవ్వొత్తి మరియు సబ్బు తయారీకి స్వచ్ఛమైన సపోష్నికోవియా డివారికాటా నూనె, రీడ్ బర్నర్ డిఫ్యూజర్‌ల కోసం కొత్త హోల్‌సేల్ డిఫ్యూజర్ ముఖ్యమైన నూనె.

చిన్న వివరణ:

 

2.1. SDE తయారీ

SD యొక్క రైజోమ్‌లను హాన్‌హెర్బ్ కో. (గురి, కొరియా) నుండి ఎండిన మూలికగా కొనుగోలు చేశారు. కొరియా ఇన్‌స్టిట్యూట్ ఆఫ్ ఓరియంటల్ మెడిసిన్ (KIOM)కి చెందిన డాక్టర్ గో-యా చోయ్ ద్వారా మొక్కల పదార్థాలను వర్గీకరణపరంగా నిర్ధారించారు. ఒక వోచర్ నమూనా (సంఖ్య 2014 SDE-6) కొరియన్ హెర్బేరియం ఆఫ్ స్టాండర్డ్ హెర్బల్ రిసోర్సెస్‌లో జమ చేయబడింది. SD (320 గ్రా) యొక్క ఎండిన రైజోమ్‌లను 70% ఇథనాల్ (2 గంటల రిఫ్లక్స్‌తో)తో రెండుసార్లు సంగ్రహించారు మరియు ఆ సారం తగ్గిన ఒత్తిడిలో కేంద్రీకరించబడింది. కషాయాన్ని ఫిల్టర్ చేసి, లైయోఫైలైజ్ చేసి, 4°C వద్ద నిల్వ చేశారు. ముడి ప్రారంభ పదార్థాల నుండి ఎండిన సారం దిగుబడి 48.13% (w/w).

 

2.2. క్వాంటిటేటివ్ హై-పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (HPLC) విశ్లేషణ

HPLC వ్యవస్థ (వాటర్స్ కో., మిల్ఫోర్డ్, MA, USA) మరియు ఫోటోడియోడ్ శ్రేణి డిటెక్టర్‌తో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ జరిగింది. SDE యొక్క HPLC విశ్లేషణ కోసం, ప్రాథమిక-O-గ్లూకోసిల్సిమిఫుగిన్ ప్రమాణాన్ని కొరియా ప్రమోషన్ ఇన్స్టిట్యూట్ ఫర్ ట్రెడిషనల్ మెడిసిన్ ఇండస్ట్రీ (జియోంగ్సాన్, కొరియా) నుండి కొనుగోలు చేశారు, మరియుసెకండ్-O-గ్లూకోసిల్హామాడోల్ మరియు 4′-O-β-డి-గ్లూకోసిల్-5-O-మిథైల్విసామినాల్ మా ప్రయోగశాలలో వేరుచేయబడింది మరియు స్పెక్ట్రల్ విశ్లేషణల ద్వారా గుర్తించబడింది, ప్రధానంగా NMR మరియు MS ద్వారా.

SDE నమూనాలను (0.1 mg) 70% ఇథనాల్ (10 mL) లో కరిగించారు. XSelect HSS T3 C18 కాలమ్ (4.6 × 250 mm, 5) తో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన జరిగింది.μm, వాటర్స్ కో., మిల్ఫోర్డ్, MA, USA). మొబైల్ దశలో 1.0 mL/min ప్రవాహ రేటుతో నీటిలో (B) అసిటోనిట్రైల్ (A) మరియు 0.1% ఎసిటిక్ ఆమ్లం ఉన్నాయి. బహుళ దశల ప్రవణత ప్రోగ్రామ్‌ను ఈ క్రింది విధంగా ఉపయోగించారు: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min), మరియు 20–65% A (23–40 min). గుర్తింపు తరంగదైర్ఘ్యం 210–400 nm వద్ద స్కాన్ చేయబడింది మరియు 254 nm వద్ద నమోదు చేయబడింది. ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్ 10.0μL. మూడు క్రోమోన్‌ల నిర్ధారణకు ప్రామాణిక పరిష్కారాలు 7.781 mg/mL తుది సాంద్రత వద్ద తయారు చేయబడ్డాయి (ప్రైమ్-O-గ్లూకోసైల్సిమిఫుగిన్), 31.125 mg/mL (4′-O-β-డి-గ్లూకోసిల్-5-O-మిథైల్విసామినోల్), మరియు 31.125 mg/mL (సెకండ్-O-గ్లూకోసిల్హామాడోల్) మిథనాల్‌లో ఉంచి 4°C వద్ద ఉంచబడుతుంది.

2.3. శోథ నిరోధక కార్యకలాపాల మూల్యాంకనంఇన్ విట్రో

2.3.1. కణ సంస్కృతి మరియు నమూనా చికిత్స

RAW 264.7 కణాలను అమెరికన్ టైప్ కల్చర్ కలెక్షన్ (ATCC, మనస్సాస్, VA, USA) నుండి పొందారు మరియు 1% యాంటీబయాటిక్స్ మరియు 5.5% FBS కలిగిన DMEM మాధ్యమంలో పెంచారు. కణాలను 37°C వద్ద 5% CO2 తేమతో కూడిన వాతావరణంలో పొదిగించారు. కణాలను ఉత్తేజపరిచేందుకు, మాధ్యమాన్ని తాజా DMEM మాధ్యమంతో మరియు లిపోపాలిసాకరైడ్ (LPS, సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్ కెమికల్ కో., సెయింట్ లూయిస్, MO, USA) 1 వద్ద భర్తీ చేశారు.μSDE సమక్షంలో లేదా లేకపోవడంతో g/mL జోడించబడింది (200 లేదా 400μg/mL) అదనంగా 24 గంటలకు.

2.3.2. నైట్రిక్ ఆక్సైడ్ (NO), ప్రోస్టాగ్లాండిన్ E2 (PGE2), ట్యూమర్ నెక్రోసిస్ ఫ్యాక్టర్ నిర్ధారణ-α(టిఎన్ఎఫ్-α), మరియు ఇంటర్‌లుకిన్-6 (IL-6) ఉత్పత్తి

కణాలను SDE తో చికిత్స చేసి, LPS తో 24 గంటలు ప్రేరేపించారు. మునుపటి అధ్యయనం ప్రకారం గ్రీస్ రియాజెంట్ ఉపయోగించి నైట్రేట్‌ను కొలవడం ద్వారా ఎటువంటి ఉత్పత్తిని విశ్లేషించలేదు [12]. శోథ సైటోకైన్‌లు PGE2, TNF- స్రావంα, మరియు తయారీదారు సూచనల ప్రకారం ELISA కిట్ (R&D వ్యవస్థలు) ఉపయోగించి IL-6 నిర్ణయించబడింది. వాలక్ ఎన్విజన్ ఉపయోగించి NO మరియు సైటోకిన్ ఉత్పత్తిపై SDE యొక్క ప్రభావాలను 540 nm లేదా 450 nm వద్ద నిర్ణయించారు.™ ఐయోనిమైక్రోప్లేట్ రీడర్ (పెర్కిన్ఎల్మర్).

2.4. ఆస్టియో ఆర్థరైటిస్ వ్యతిరేక కార్యకలాపాల మూల్యాంకనంవివోలో

2.4.1. జంతువులు

7 వారాల వయస్సు గల మగ స్ప్రాగ్-డావ్లీ ఎలుకలను సామ్టాకో ఇంక్. (ఒసాన్, కొరియా) నుండి కొనుగోలు చేసి, 12-గంటల కాంతి/చీకటి చక్రంతో నియంత్రిత పరిస్థితులలో ఉంచారు.°C మరియు% తేమ. ఎలుకలకు ప్రయోగశాల ఆహారం మరియు నీరు అందించారు.ఇష్టానుసారం. అన్ని ప్రయోగాత్మక విధానాలు నేషనల్ ఇన్స్టిట్యూట్ ఆఫ్ హెల్త్ (NIH) మార్గదర్శకాలకు అనుగుణంగా నిర్వహించబడ్డాయి మరియు డేజియోన్ విశ్వవిద్యాలయం (డేజియోన్, రిపబ్లిక్ ఆఫ్ కొరియా) యొక్క జంతు సంరక్షణ మరియు వినియోగ కమిటీచే ఆమోదించబడ్డాయి.

2.4.2. ఎలుకలలో MIA తో OA యొక్క ఇండక్షన్

అధ్యయనం ప్రారంభించే ముందు జంతువులను యాదృచ్ఛికంగా చేసి చికిత్స సమూహాలకు కేటాయించారు (ప్రతి సమూహానికి). MIA ద్రావణం (3 mg/50μL 0.9% సెలైన్) ను కెటామైన్ మరియు జిలాజైన్ మిశ్రమంతో ప్రేరేపించబడిన అనస్థీషియా కింద కుడి మోకాలిలోని ఇంట్రా-ఆర్టిక్యులర్ స్పేస్‌లోకి నేరుగా ఇంజెక్ట్ చేశారు. ఎలుకలను యాదృచ్ఛికంగా నాలుగు గ్రూపులుగా విభజించారు: (1) MIA ఇంజెక్షన్ లేని సెలైన్ గ్రూప్, (2) MIA ఇంజెక్షన్ ఉన్న MIA గ్రూప్, (3) SDE- చికిత్స పొందిన గ్రూప్ (200 mg/kg) MIA ఇంజెక్షన్ ఉన్న, మరియు (4) ఇండోమెథాసిన్- (IM-) చికిత్స పొందిన గ్రూప్ (2 mg/kg) MIA ఇంజెక్షన్ ఉన్న. ఎలుకలకు MIA ఇంజెక్షన్‌కు 1 వారం ముందు 4 వారాల పాటు SDE మరియు IM తో మౌఖికంగా ఇవ్వబడింది. ఈ అధ్యయనంలో ఉపయోగించిన SDE మరియు IM మోతాదు మునుపటి అధ్యయనాలలో ఉపయోగించిన వాటిపై ఆధారపడి ఉంటుంది [10,13,14].

2.4.3. హిండ్పా బరువు మోసే పంపిణీ యొక్క కొలతలు

OA ప్రేరణ తర్వాత, హిండ్‌పాస్ యొక్క బరువు మోసే సామర్థ్యంలో అసలు సమతుల్యత దెబ్బతింది. బరువు మోసే సహనంలో మార్పులను అంచనా వేయడానికి ఒక అసమర్థత పరీక్షకుడు (లింటన్ ఇన్స్ట్రుమెంటేషన్, నార్ఫోక్, UK) ఉపయోగించబడింది. ఎలుకలను జాగ్రత్తగా కొలిచే గదిలో ఉంచారు. హిండ్ లింబ్ ద్వారా చూపబడిన బరువు మోసే శక్తిని 3 సెకన్ల వ్యవధిలో సగటున లెక్కించారు. బరువు పంపిణీ నిష్పత్తిని ఈ క్రింది సమీకరణం ద్వారా లెక్కించారు: [కుడి హిండ్ లింబ్‌పై బరువు/(కుడి హిండ్ లింబ్‌పై బరువు + ఎడమ హిండ్ లింబ్‌పై బరువు)] × 100 [15].

2.4.4. సీరం సైటోకిన్ స్థాయిల కొలతలు

రక్త నమూనాలను 4°C వద్ద 10 నిమిషాల పాటు 1,500 గ్రాముల వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేశారు; తరువాత సీరం సేకరించి ఉపయోగం వరకు −70°C వద్ద నిల్వ చేశారు. IL-1 స్థాయిలుβ, IL-6, TNF-α, మరియు సీరంలోని PGE2 ను తయారీదారు సూచనల ప్రకారం R&D సిస్టమ్స్ (మిన్నియాపాలిస్, MN, USA) నుండి ELISA కిట్‌లను ఉపయోగించి కొలుస్తారు.

2.4.5. రియల్-టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ RT-PCR విశ్లేషణ

TRI reagent® (సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్, సెయింట్ లూయిస్, MO, USA) ఉపయోగించి మోకాలి కీలు కణజాలం నుండి మొత్తం RNA సంగ్రహించబడింది, SYBR గ్రీన్‌తో TM వన్ స్టెప్ RT PCR కిట్ (అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్, గ్రాండ్ ఐలాండ్, NY, USA) ఉపయోగించి cDNA మరియు PCR-యాంప్లిఫైడ్‌లోకి రివర్స్-ట్రాన్స్క్రిప్ట్ చేయబడింది. అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్ 7500 రియల్-టైమ్ PCR సిస్టమ్ (అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్, గ్రాండ్ ఐలాండ్, NY, USA) ఉపయోగించి రియల్-టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ PCR నిర్వహించబడింది. ప్రైమర్ సీక్వెన్స్‌లు మరియు ప్రోబ్-సీక్వెన్స్ టేబుల్‌లో చూపబడ్డాయి.1. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం (అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్, ఫోస్టర్, CA, USA) DNA పాలిమరేస్ కలిగిన TaqMan® యూనివర్సల్ PCR మాస్టర్ మిశ్రమంతో నమూనా cDNAల యొక్క అల్కోట్‌లు మరియు GAPDH cDNA యొక్క సమాన మొత్తాన్ని విస్తరించారు. PCR పరిస్థితులు 50°C వద్ద 2 నిమిషాలు, 94°C వద్ద 10 నిమిషాలు, 95°C వద్ద 15 సెకన్లు మరియు 40 చక్రాలకు 60°C వద్ద 1 నిమిషం. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం, లక్ష్య జన్యువు యొక్క సాంద్రతను తులనాత్మక Ct (యాంప్లిఫికేషన్ ప్లాట్ మరియు థ్రెషోల్డ్ మధ్య క్రాస్-పాయింట్ వద్ద థ్రెషోల్డ్ సైకిల్ సంఖ్య) పద్ధతిని ఉపయోగించి నిర్ణయించారు.

FOB ధర:US $0.5 - 9,999 / ముక్క

కనీస ఆర్డర్ పరిమాణం:100 ముక్కలు/ముక్కలు

సరఫరా సామర్ధ్యం:నెలకు 10000 ముక్కలు/ముక్కలు