కొవ్వొత్తి మరియు సబ్బు తయారీకి స్వచ్ఛమైన సపోష్నికోవియా దివారికాటా నూనె రీడ్ బర్నర్ డిఫ్యూజర్‌ల కోసం కొత్త డిఫ్యూజర్ ఎసెన్షియల్ ఆయిల్

చిన్న వివరణ:

 

2.1 SDE తయారీ

SD యొక్క రైజోమ్‌లు హాన్‌హెర్బ్ కో. (గురి, కొరియా) నుండి ఎండిన హెర్బ్‌గా కొనుగోలు చేయబడ్డాయి. కొరియా ఇన్‌స్టిట్యూట్ ఆఫ్ ఓరియంటల్ మెడిసిన్ (KIOM)కి చెందిన డాక్టర్ గో-యా చోయ్ ద్వారా మొక్కల పదార్థాలు వర్గీకరణపరంగా నిర్ధారించబడ్డాయి. వోచర్ నమూనా (సంఖ్య 2014 SDE-6) కొరియన్ హెర్బేరియం ఆఫ్ స్టాండర్డ్ హెర్బల్ రిసోర్సెస్‌లో డిపాజిట్ చేయబడింది. SD (320 గ్రా) యొక్క ఎండిన రైజోమ్‌లు 70% ఇథనాల్ (2 h రిఫ్లక్స్‌తో)తో రెండుసార్లు సంగ్రహించబడ్డాయి మరియు సారం తగ్గిన ఒత్తిడిలో కేంద్రీకరించబడింది. కషాయాలను ఫిల్టర్ చేసి, లైయోఫిలైజ్ చేసి, 4 ° C వద్ద నిల్వ చేస్తారు. ముడి ప్రారంభ పదార్థాల నుండి ఎండిన సారం యొక్క దిగుబడి 48.13% (w/w).

 

2.2 క్వాంటిటేటివ్ హై-పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (HPLC) విశ్లేషణ

HPLC సిస్టమ్ (వాటర్స్ కో., మిల్‌ఫోర్డ్, MA, USA) మరియు ఫోటోడియోడ్ అర్రే డిటెక్టర్‌తో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విశ్లేషణ జరిగింది. SDE యొక్క HPLC విశ్లేషణ కోసం, ప్రాథమిక-O-గ్లూకోసైల్సిమిఫుగిన్ ప్రమాణం కొరియా ప్రమోషన్ ఇన్స్టిట్యూట్ ఫర్ ట్రెడిషనల్ మెడిసిన్ ఇండస్ట్రీ (జియోంగ్సన్, కొరియా) నుండి కొనుగోలు చేయబడింది మరియుసెకను-ఓ-గ్లూకోసిల్హమౌడోల్ మరియు 4′-O-β-డి-గ్లూకోసిల్-5-O-మిథైల్విసామినోల్ మా ప్రయోగశాలలో వేరుచేయబడింది మరియు స్పెక్ట్రల్ విశ్లేషణల ద్వారా గుర్తించబడింది, ప్రధానంగా NMR మరియు MS ద్వారా.

SDE నమూనాలు (0.1 mg) 70% ఇథనాల్ (10 mL)లో కరిగించబడ్డాయి. XSelect HSS T3 C18 నిలువు వరుస (4.6 × 250 mm, 5)తో క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన జరిగింది.μm, వాటర్స్ కో., మిల్‌ఫోర్డ్, MA, USA). మొబైల్ దశలో అసిటోనిట్రైల్ (A) మరియు నీటిలో 0.1% ఎసిటిక్ యాసిడ్ (B) 1.0 mL/min ప్రవాహం రేటుతో ఉంటుంది. మల్టీస్టెప్ గ్రేడియంట్ ప్రోగ్రామ్ క్రింది విధంగా ఉపయోగించబడింది: 5% A (0 నిమి), 5–20% A (0–10 నిమి), 20% A (10–23 నిమి), మరియు 20–65% A (23–40 నిమి ) గుర్తింపు తరంగదైర్ఘ్యం 210-400 nm వద్ద స్కాన్ చేయబడింది మరియు 254 nm వద్ద రికార్డ్ చేయబడింది. ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్ 10.0μL. మూడు క్రోమోన్‌ల నిర్ధారణకు ప్రామాణిక పరిష్కారాలు 7.781 mg/mL (ప్రిమ్-) తుది సాంద్రతతో తయారు చేయబడ్డాయి.O-గ్లూకోసైల్సిమిఫుగిన్), 31.125 mg/mL (4′-O-β-డి-గ్లూకోసిల్-5-O-మిథైల్విసామినోల్), మరియు 31.125 mg/mL (సెకను-ఓ-గ్లూకోసైల్‌హమౌడోల్) మిథనాల్‌లో మరియు 4°C వద్ద ఉంచబడుతుంది.

2.3 యాంటీ ఇన్ఫ్లమేటరీ యాక్టివిటీ యొక్క మూల్యాంకనంఇన్ విట్రో

2.3.1 కణ సంస్కృతి మరియు నమూనా చికిత్స

RAW 264.7 కణాలు అమెరికన్ టైప్ కల్చర్ కలెక్షన్ (ATCC, Manassas, VA, USA) నుండి పొందబడ్డాయి మరియు 1% యాంటీబయాటిక్స్ మరియు 5.5% FBS కలిగిన DMEM మాధ్యమంలో పెంచబడ్డాయి. కణాలు 37°C వద్ద 5% CO2 తేమతో కూడిన వాతావరణంలో పొదిగేవి. కణాలను ఉత్తేజపరిచేందుకు, మాధ్యమం 1 వద్ద తాజా DMEM మాధ్యమం మరియు లిపోపాలిసాకరైడ్ (LPS, సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్ కెమికల్ కో., సెయింట్ లూయిస్, MO, USA)తో భర్తీ చేయబడింది.μSDE (200 లేదా 400) సమక్షంలో లేదా లేకపోవడంతో g/mL జోడించబడిందిμg/mL) అదనంగా 24 గం.

2.3.2 నైట్రిక్ ఆక్సైడ్ (NO), ప్రోస్టాగ్లాండిన్ E2 (PGE2), ట్యూమర్ నెక్రోసిస్ కారకం- నిర్ధారణα(TNF-α), మరియు ఇంటర్‌లుకిన్-6 (IL-6) ఉత్పత్తి

కణాలు SDEతో చికిత్స చేయబడ్డాయి మరియు 24 గంటలకు LPS తో ప్రేరేపించబడ్డాయి. మునుపటి అధ్యయనం ప్రకారం గ్రిస్ రియాజెంట్ ఉపయోగించి నైట్రేట్‌ను కొలవడం ద్వారా NO ఉత్పత్తిని విశ్లేషించారు [12]. ఇన్ఫ్లమేటరీ సైటోకిన్‌ల స్రావం PGE2, TNF-α, మరియు తయారీదారు సూచనల ప్రకారం ELISA కిట్ (R&D సిస్టమ్స్) ఉపయోగించి IL-6 నిర్ణయించబడింది. NO మరియు సైటోకిన్ ఉత్పత్తిపై SDE యొక్క ప్రభావాలు 540 nm లేదా 450 nm వద్ద వాలాక్ ఎన్‌విజన్‌ని ఉపయోగించి నిర్ణయించబడ్డాయి™మైక్రోప్లేట్ రీడర్ (పెర్కిన్ ఎల్మెర్).

2.4 యాంటీ ఆస్టియో ఆర్థరైటిస్ కార్యాచరణ యొక్క మూల్యాంకనంVivo లో

2.4.1 జంతువులు

మగ స్ప్రాగ్-డావ్లీ ఎలుకలు (7 వారాల వయస్సు) Samtako Inc. (Osan, Korea) నుండి కొనుగోలు చేయబడ్డాయి మరియు 12-h కాంతి/చీకటి చక్రంతో నియంత్రిత పరిస్థితుల్లో ఉంచబడ్డాయి°C మరియు% తేమ. ఎలుకలకు ప్రయోగశాల ఆహారం మరియు నీరు అందించబడ్డాయియాడ్ లిబిటమ్. అన్ని ప్రయోగాత్మక విధానాలు నేషనల్ ఇన్స్టిట్యూట్ ఆఫ్ హెల్త్ (NIH) మార్గదర్శకాలకు అనుగుణంగా నిర్వహించబడ్డాయి మరియు డేజియోన్ విశ్వవిద్యాలయం (డేజియోన్, రిపబ్లిక్ ఆఫ్ కొరియా) యొక్క జంతు సంరక్షణ మరియు వినియోగ కమిటీ ఆమోదించింది.

2.4.2 ఎలుకలలో MIAతో OA యొక్క ఇండక్షన్

అధ్యయనం ప్రారంభించే ముందు జంతువులను యాదృచ్ఛికంగా మార్చారు మరియు చికిత్స సమూహాలకు కేటాయించారు (సమూహానికి). MIA ద్రావణం (3 mg/50μ0.9% సెలైన్ యొక్క L) నేరుగా కెటామైన్ మరియు జిలాజైన్ మిశ్రమంతో ప్రేరేపించబడిన అనస్థీషియా కింద కుడి మోకాలి ఇంట్రా-ఆర్టిక్యులర్ స్పేస్‌లోకి ఇంజెక్ట్ చేయబడింది. ఎలుకలను యాదృచ్ఛికంగా నాలుగు గ్రూపులుగా విభజించారు: (1) MIA ఇంజెక్షన్ లేని సెలైన్ సమూహం, (2) MIA ఇంజెక్షన్‌తో MIA సమూహం, (3) MIA ఇంజెక్షన్‌తో SDE- చికిత్స చేయబడిన సమూహం (200 mg/kg) మరియు (4 MIA ఇంజెక్షన్‌తో ఇండోమెథాసిన్- (IM-) చికిత్స సమూహం (2 mg/kg). MIA ఇంజెక్షన్‌కు 1 వారం ముందు 4 వారాల పాటు ఎలుకలు SDE మరియు IMలతో మౌఖికంగా నిర్వహించబడ్డాయి. ఈ అధ్యయనంలో ఉపయోగించిన SDE మరియు IM యొక్క మోతాదు మునుపటి అధ్యయనాలలో ఉపయోగించిన వారి ఆధారంగా [10,13,14].

2.4.3 హిండ్‌పా వెయిట్-బేరింగ్ డిస్ట్రిబ్యూషన్ యొక్క కొలతలు

OA ఇండక్షన్ తర్వాత, వెనుక పాదాల బరువు మోసే సామర్థ్యంలో అసలైన బ్యాలెన్స్ దెబ్బతింది. బరువు మోసే సహనంలో మార్పులను అంచనా వేయడానికి అసమర్థత టెస్టర్ (లింటన్ ఇన్‌స్ట్రుమెంటేషన్, నార్ఫోక్, UK) ఉపయోగించబడింది. ఎలుకలను జాగ్రత్తగా కొలిచే గదిలో ఉంచారు. వెనుక అవయవం ద్వారా బరువు మోసే శక్తి సగటున 3 సెకన్ల వ్యవధిలో ఉంటుంది. బరువు పంపిణీ నిష్పత్తి క్రింది సమీకరణం ద్వారా లెక్కించబడుతుంది: [కుడి వెనుక అవయవం మీద బరువు/(కుడి వెనుక అవయవం మీద బరువు + ఎడమ వెనుక అవయవం మీద బరువు)] × 100 [15].

2.4.4 సీరం సైటోకిన్ స్థాయిల కొలతలు

రక్త నమూనాలను 4°C వద్ద 10 నిమిషాలకు 1,500 గ్రా వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేశారు; అప్పుడు సీరం సేకరించబడింది మరియు ఉపయోగం వరకు −70 ° C వద్ద నిల్వ చేయబడుతుంది. IL-1 స్థాయిలుβ, IL-6, TNF-α, మరియు సీరంలోని PGE2 తయారీదారు సూచనల ప్రకారం R&D సిస్టమ్స్ (మిన్నియాపాలిస్, MN, USA) నుండి ELISA కిట్‌లను ఉపయోగించి కొలుస్తారు.

2.4.5 రియల్-టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ RT-PCR విశ్లేషణ

TRI రియాజెంట్ ® (సిగ్మా-ఆల్డ్రిచ్, సెయింట్ లూయిస్, MO, USA) ఉపయోగించి మోకాలి కీలు కణజాలం నుండి మొత్తం RNA సంగ్రహించబడింది, cDNAలోకి రివర్స్-ట్రాన్స్‌క్రిప్ట్ చేయబడింది మరియు SYBR గ్రీన్ (అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్)తో TM వన్ స్టెప్ RT PCR కిట్‌ని ఉపయోగించి PCR-యాంప్లిఫై చేయబడింది. , గ్రాండ్ ఐలాండ్, NY, USA). అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్ 7500 రియల్-టైమ్ PCR సిస్టమ్ (అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్, గ్రాండ్ ఐలాండ్, NY, USA) ఉపయోగించి రియల్-టైమ్ క్వాంటిటేటివ్ PCR ప్రదర్శించబడింది. ప్రైమర్ సీక్వెన్సులు మరియు ప్రోబ్-సీక్వెన్స్ టేబుల్‌లో చూపించబడ్డాయి1. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం (అప్లైడ్ బయోసిస్టమ్స్, ఫోస్టర్, CA, USA) DNA పాలిమరేస్‌ను కలిగి ఉన్న TaqMan® యూనివర్సల్ PCR మాస్టర్ మిశ్రమంతో నమూనా cDNAల ఆల్కాట్‌లు మరియు GAPDH cDNA యొక్క సమాన మొత్తం విస్తరించబడింది. PCR పరిస్థితులు 50 ° C వద్ద 2 నిమిషాలు, 94 ° C వద్ద 10 నిమిషాలు, 95 ° C వద్ద 15 సెకన్లు మరియు 40 చక్రాలకు 60 ° C వద్ద 1 నిమి. తయారీదారు సూచనల ప్రకారం, తులనాత్మక Ct (యాంప్లిఫికేషన్ ప్లాట్ మరియు థ్రెషోల్డ్ మధ్య క్రాస్ పాయింట్ వద్ద థ్రెషోల్డ్ సైకిల్ నంబర్) పద్ధతిని ఉపయోగించి లక్ష్య జన్యువు యొక్క ఏకాగ్రత నిర్ణయించబడింది.

FOB ధర:US $0.5 - 9,999 / పీస్

కనీస ఆర్డర్ పరిమాణం:100 పీస్/పీసెస్

సరఫరా సామర్థ్యం:నెలకు 10000 పీస్/పీసెస్